bac S 2008 Nouméa
Partie 2.2 : enseignement de spécialité (5 points) Des débuts de la génétique aux enjeux actuels des biotechnologies
La mise au point d'un vaccin contre le virus de l'hépatite B nécessite l'obtention de la protéine HBs présente sur l'enveloppe virale. Dans ce but, on fabrique des bactéries transgéniques capables de produire cette molécule.
A partir des informations extraites des documents 1, 2 et 3, mises en relation avec vos connaissances, expliquez pourquoi seules les colonies bactériennes 5, 9 ,13 et 20 sont sélectionnées pour la production de la protéine HBs.
document 1 : le plasmide utilisé pour la transgénèse
Le plasmide est une petite molécule d'ADN circulaire présente chez les bactéries à côté du chromosome bactérien.
*L'ampicilline est un antibiotique qui tue les bactéries qui ne possèdent pas le gène de résistance et celles dont le gène de résistance a été coupé.
document 2 : Obtention des bactéries transgéniques
2a : action de l'enzyme de restriction Eco R1
Les chercheurs ont extrait l'ADN du virus de l'hépatite B et l'ont traité par une enzyme de restriction Eco R1 qui reconnait la séquence GAATTC. Le schéma suivant montre le fragment d'ADN contenant le gène de la molécule HBs à intégrer après action d'Eco R1.
2b : protocole de réalisation des plasmides recombinés
2c : introduction de plasmides dans les bactéries
Les plasmides sont mis en contact avec les bactéries incapables de synthétiser de la leucine et non résistantes à l'ampicilline. Grâce à un traitement approprié les plasmides peuvent pénétrer dans ces bactéries. On obtient 3 sortes de bactéries :
- des bactéries ne contenant pas le plasmide,
- des bactéries contenant un plasmide non recombiné,
- des bactéries contenant le plasmide recombiné.
document 3 : protocole de sélection des bactéries produisant la proteine HBs.
Afin d'identifier les colonies, les bactéries sont cultivées sur des milieux nutritifs différents. Si les conditions du milieu leur sont favorables elles se multiplient et forment des colonies circulaires.
Une empreinte sur velours permet de déposer au même endroit sur une autre boite de Pétri ces colonies.