| Chromatographie : La répétition de chromatographies est intéressante dans l'optique d'un formation expérimentale (et de son évaluation), mais les sucres utilisés comme référence présentent des vitesses de migration relativement proches; le premier solvant semble donner les meilleurs résultats. Observation des amyloplastes : |
1 Bureau
solutions à 5g.L-1 (10 ou 20 cm3 suffisent) dans de petits bechers
- fructose
- saccharose
- glucose
- maltose
plants de courge ou jus de fruit (la sève de courge contient essentiellement du saccharose)
embouts de micropipette ou pipettes pasteur (1 par solution de sucre + 1 pour la sève ou le jus de fruit)
plaques à chromatographie sur gel de silice (placer les plaques à chromatographie quelques heures avant ou la veille 30 min dans une étuve à 100°C pour les "réactiver")
révélateur dans un ou deux petits bacs de couleur claire (ex : bac à glace)
solvant pour chromatographie (ce qui reste)
(hotte si le révélateur est le Molish)
Solvant pour chromatographie sur gel de silice
méthyléthylcétone 60%
acide éthanoïque 20%
méthanol 20% (peut être remplacé par de l'éthanol, ce qui évite de sécher les plaques sous la hotte)
sulfite de Na une pincée
Autre solvant pour chromatographie sur gel de silice
Butanol 1 : 40 ml
Propanone : 50 ml
Eau distillée : 10 ml
Remarque : la pyridine entrant de la composition de certains solvants (www.ac-reunion.fr/pedagogie/mslp/ANCIENSITE/labo/prod/chromato/ccm_jus.doc, www.ac-toulouse.fr/svt/labo/solvants.html) est fortement toxique, inflammable et explosive :
Toxicological Profile for Pyridine www.atsdr.cdc.gov/toxprofiles/tp52.html et www.cdc.gov/niosh/ipcsnfrn/nfrn0323.html
Révélateur :
permanganate de K à 20g/l 50%
carbonate disodique anhydre à 40g/l 50%
(mélanger les deux solutions juste avant l'emploi)
ou liquide de Molish
naphtol1 0,25g
éthanol 50ml
acide sulfurique à 20% 50ml
conserver au réfrigérateur dans un flacon ambré (un mois maxi)
utiliser dans un pulvérisateur sous la hotte avec lunettes de protection
pomme de terre
scalpel
lames
lamelles
vidéomicroscope
huile à immersion
scanner ou appareil photo numérique
- fructose
- saccharose
- glucose
- maltose
plants de courge ou jus de fruit (la sève de courge contient essentiellement du saccharose)
embouts de micropipette ou pipettes pasteur (1 par solution de sucre + 1 pour la sève ou le jus de fruit)
plaques à chromatographie sur gel de silice (placer les plaques à chromatographie quelques heures avant ou la veille 30 min dans une étuve à 100°C pour les "réactiver")
révélateur dans un ou deux petits bacs de couleur claire (ex : bac à glace)
solvant pour chromatographie (ce qui reste)
(hotte si le révélateur est le Molish)
Solvant pour chromatographie sur gel de silice
méthyléthylcétone 60%
acide éthanoïque 20%
méthanol 20% (peut être remplacé par de l'éthanol, ce qui évite de sécher les plaques sous la hotte)
sulfite de Na une pincée
Autre solvant pour chromatographie sur gel de silice
Butanol 1 : 40 ml
Propanone : 50 ml
Eau distillée : 10 ml
Toxicological Profile for Pyridine www.atsdr.cdc.gov/toxprofiles/tp52.html et www.cdc.gov/niosh/ipcsnfrn/nfrn0323.html
Révélateur :
permanganate de K à 20g/l 50%
carbonate disodique anhydre à 40g/l 50%
(mélanger les deux solutions juste avant l'emploi)
ou liquide de Molish
naphtol1 0,25g
éthanol 50ml
acide sulfurique à 20% 50ml
conserver au réfrigérateur dans un flacon ambré (un mois maxi)
utiliser dans un pulvérisateur sous la hotte avec lunettes de protection
pomme de terre
scalpel
lames
lamelles
vidéomicroscope
huile à immersion
scanner ou appareil photo numérique